Re: [問題] 這樣E-coli有受到污染嗎?

看板Biology (生物學)作者 (Orz)時間4年前 (2020/02/18 21:24), 編輯推噓6(6017)
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※ 引述《physics11 (11號)》之銘言: : 【問題】:這兩個月來好幾次做實驗 : 塗完盤後E coli的菌都長這樣 : http://i.imgur.com/4tDXz49.jpg
: (圖中的菌種已經序列稀釋到10^-7次方了) : 這個e coli真的是e coli嗎? : 【問題起因】: : 去年11月做實驗還很正常,但12月開始就有幾盤的菌落數不出來(暈開成這樣根本沒辦法數) : 目前嘗試改進手法、 : 用去年七月繼代的菌來塗盤, : 也都是得到類似的結果, : 甚至稀釋到-8次方也是有同樣的現象 : 【個人看法】: : 老實說,這根本不是我印象中e coli的morphology, : 雖然在research gate上有人說這很正常,學長也跟我我這只是e coli長太大了要我再稀釋,但是都稀釋到-8次方了也數不出來,我打從心底覺得一直稀釋也不是解決的辦法,故上來請教各位先進 : 【參考資料/連結】:無 先問幾個基礎問題, 看起來你是自己配的agar plate, 1.你可以試著把plate直接丟去培養看看是否會長菌嗎? 2.你的細菌濃度是怎麼訂出來的?600nm Absorbance? 你是基於McFarland standard的基礎去做實驗嗎? 3.你序列稀釋有換tip嗎? tip是否只插入液面下方一點點 還是整支插進去broth內? 以上可以可以給你一些方向參考一下 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.96.240.46 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biology/M.1582032293.A.34F.html

02/26 23:06, 4年前 , 1F
不好意思,小弟近日業務繁忙,現在才看到這篇回文
02/26 23:06, 1F

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1.單純丟plate不會長東西,無論是在hood還是在incubato
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r都不會有這樣的現象
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2.用plate count的方式,稀釋後塗盤數菌落,至於大大提
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及的McFarland我們沒有做這些
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3.序列稀釋都有換tip
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02/26 23:08, 4年前 , 7F
我每次都是吸取液面下一點而已沒有整支伸進去(我們的p
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ipette會跟tube卡住)
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02/26 23:08, 4年前 , 9F
但是吸取前都會vortex 15秒
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02/28 01:11, 4年前 , 10F
養幾小時?
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03/08 19:04, 4年前 , 11F
回樓上大大,養24小時
03/08 19:04, 11F

03/17 17:20, 4年前 , 12F
這是序列稀釋6次方的結果http://i.imgur.com/UfCvLGm.j
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03/17 17:20, 4年前 , 13F
pg
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03/17 17:20, 4年前 , 14F
已經放棄希望了
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03/17 17:21, 4年前 , 15F

03/18 01:37, 4年前 , 16F
養太久
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03/19 00:46, 4年前 , 17F
這是transformation嗎? 然後沒有在養整天的啦你在種
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菜逆 16小時以內要收
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03/19 01:21, 4年前 , 19F
回覆樓上大大,可能真的是養太久了,我會試試看在16小
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03/19 01:22, 4年前 , 20F
時內操作完,但是之前放24小時沒有出現這樣的情況
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03/19 01:22, 4年前 , 21F
然後這不是transformation
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03/21 08:17, 4年前 , 22F
不是transformation是什麼?劃glycetol stock嗎?那你
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03/21 08:17, 4年前 , 23F
怎麼會不劃象限還用塗的難怪長成這樣啊
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