Re: 請問protein 保存方法的問題
> ==> aming.bbs@reactor.ns.nthu.edu.tw (卡在某個時間裡) 的文章中提到:
> ※ 引述《aggaci.bbs@bbs.badcow.com.tw (......)》之銘言：
> > 最近純化了一批蛋白質出來
> > 目的是要用來處理細胞
> > 我覺得我的蛋白質應該要分裝 兵在-80
> > 要用時再拿其中一管來用 用完就丟 不重複使用
> > 可是這樣很佔空間 分裝的話大概有上百管吧
> > (系上一個老師也這麼說)
> > 可是學長是說
> > 他把整管protein加glycerol冰在-80 re-use
> > 那我很疑或
> > 到底哪一種才是較好的
> > 有人有類似的經驗嗎
> > 謝謝
> 兩者合併使用 另外 冷凍的protein濃度要高一點
> 不然protein解凍後會loss掉或是失去功用
> 如果你的protein在4℃算穩定的話 可以在4℃準備working stock
> 簡單的說 儲存在-80的protein濃度要高一點 一次大概分裝成10~20管
> 再從這10~20管的stock裡面挑一兩管稀釋到你平常做實驗會用到的濃度
> 分裝在4℃的working stock 每次做實驗就從這這working stock拿一管去用
> 等到working stock用到快完的時候 再從-80取一管再稀釋
> 祝好運
我的做法稍有不同。因為蛋白質測試的方法不同，稀釋倍率就會不一樣
所以稀釋對我而言是麻煩的。
我的蛋白質一開始就是先用用1.5ml 離心管分裝(裝1.5ml)，
把最後不足1.5ml 的分裝到0.6ml 的小離心管(每管裝0.1ml～0.2ml)，
使用蛋白質的時候先使用0.6ml管子的，用不完冰回去，蛋白質解凍三
次就丟了(其實大部分蛋白質都很耐，但保險一點好)。0.6ml裝的用完
了，那麼取出1.5ml裝的做實驗，順便將沒用完的分裝成0.6ml裝，
然後冰回去。我認為我的方法省空間、蛋白質變性的風險也不高，
值得參考。
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