Re: 請問 Yeast 2 hybrid 酵母菌篩選的流程是怎樣?
※ 引述《Legolas (遊俠--戒靈)》之銘言:
: 假設質體都已經送到yeast裡去培養了
: 而 pAS2-1質體有 GAL4 BD, Trp
: pACT2質體有 GAL4 AD, Leu
: 用SD篩選,
: 好像要篩選兩次...
: 流程是如何? 小問題 希望不吝回答 感謝您!!
1.第一次篩 準備二個SD plate
一個缺Trp 一個缺Leu
Plating
pAS2-1----->-Trp
pACT-2----->-Leu
2.培養三天 攝氏37度
3.在準備一個缺Trp,Leu的plate
在-Trp,Leu SD plate上mating
分別沾single colony shreaking 別沾太多也別沾太少
太多三天後分不清死細胞跟活細胞 太少也會長不出來
4.培養三天 攝氏37度
5.觀察有無single colony產生
--
※ Post by nothingspeak from 203-203-182-19.cable.dynamic.giga. ...
--
*Origin: ω熱帶魚天堂ω tropic.med.kmu.edu.tw
討論串 (同標題文章)
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
82
116