Re: [問題] 關於western的電泳小問題
※ 引述《jedy (想去南極跟企鵝玩!)》之銘言:
: 其實已經是大問題了
: 因為實驗需求 所以跑western
: 跑了三次 但是總是遇到一些瓶頸
: 不知道要怎麼解決 所以上來尋求一些意見
: 我所使用的是全新的bio-rad的電泳和濕式transfer設備
: 但是當我在跑電泳的時候
: 所花的時間很長 5-6小時
: 這跟我以前在做western跑電泳的情形差很多
: 本來以為是Tris buffer或是running buffer的問題
: 因為這些是自己泡的
: 結果這次全部重泡一次的
: 一開始有跑得比較順
: 但是跑到中間又開始跑不動了
: 而且這幾次我發現我的running buffer會從電泳槽會有些漏出來
: (從外槽跟內槽連接的縫隙 不是外槽破掉 我check過了)
: 所以桌子會濕濕的
: 我在猜我的電泳會比較跑不動是不是跟那個running buffer漏出來有關呢
: 我跑的是brain tissue sample
: 利用的SDS-page 為10% resolving gel 5% stacking gel
你裡面跟外面buffer的液面有差很嗎
有可能從裡面露出來 另外桌子濕濕的 是不是你的外槽壓克力那個已經破了.....
這樣應該很難跑出來ㄅ
有可能裡面的液面一直在下降你沒注意到 也有可能這樣
跑不動
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◆ From: 203.203.19.83
推
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