Re: [問題] 關於p-CREB antibody的小問題
磷酸化的蛋白會慢慢不見
所以我都是現抽現跑sds，轉到pvdf或nc後會穩一點
我之前會放幾天再一起收protein，但效果不好
還有，你那個cell signaling的抗體好像要在4度c作用O/N
我看人家用這隻的都是這樣，不知他有沒有特別建議就是了
還有，他們應該會附postive control給你
你拿過那個試過嗎?
之前學姐要是做磷酸化的話
會用到1:500，但我覺的有點傷本
我以前也用cell signaling，但我不愛用，因為要作用o/n
後來換那種一小時就可以的，雖然貴一點點
但因為作用一個小時而已，所以我會用到1:2000
37度c二小時，這樣會省一點，給你做參考^^
※ 引述《tonyroro (孤獨存在)》之銘言：
: ※ 引述《jedy (想去南極跟企鵝玩!)》之銘言：
: : 最近在用這支抗體跑western (是跟cell signaling買的)
: : 使用的sample是小鼠的腦組織（cortex hippocampus amgdala)
: : 小鼠沒做任何實驗 就純粹當control
: : 可是我怎麼跑都沒有band出來
: : 每次看到一片空白的底片...就很無言
: : 但是我跑total CREB和actin都有band
: : 想跟這裡有跑這支抗體的人交流一下
: : 我這樣是有可能哪裡有問題嗎
: : 壓的時間不夠久? (我有壓過1個小時 還是沒band)
: : 先謝謝大家的建議囉
: 你跑的是看磷酸化的抗體
: 所以在lysis cell 抽protein時
: 那個lysis buffer可能成分必須要改一下
: 可能是這樣八
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