Re: [問題] western中transfer的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (Chord7#)時間19年前 (2006/08/20 16:21), 編輯推噓5(503)
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※ 引述《CsmuKoji (hiphop MUSIC ￾  ￾)》之銘言: : 最近western都做不太出來 : 自己查了很多protocol : 發現很多protocol都說 : transfer buffer裡面要加SDS和methanol 我們家好像只有..20% methanol、10% 10x running buffer、70% ddH2O SDS? 應該不需要吧 : 請問它們的功用是什麼呢? : 還有protocol中說要加攪拌子 : 可是我們lab好像都沒有耶 : 都是濕式然後整個拿到冰箱裡去transfer : 請問有沒有加stir bar結果會差很多嗎? : 先謝謝各位同學的幫忙了 ^_^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.30

08/20 16:30, , 1F
你忽略了running buffer裡頭組成的成分了
08/20 16:30, 1F

08/20 21:06, , 2F
噢對後!
08/20 21:06, 2F

08/20 23:30, , 3F
那如果甲醇跟SDS沒加 會差很多嗎
08/20 23:30, 3F

08/23 11:23, , 4F
差很多 沒有SDS transfer效率會很差 沒methanol的話
08/23 11:23, 4F

08/23 11:23, , 5F
則是不容易將蛋白固定在膜上 大分子蛋白比較沒關係
08/23 11:23, 5F

08/23 11:25, , 6F
小分子蛋白則影響很大 我的實驗經驗.....(忘了加的結果)
08/23 11:25, 6F

08/25 09:27, , 7F
沒記錯的話若是小分子SDS最好不要加.SDS會幫助大分子bind在
08/25 09:27, 7F

08/25 09:28, , 8F
membrane上..應該是這樣吧
08/25 09:28, 8F
文章代碼(AID): #14w1kTfR (Biotech)
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