[問題] 請問real time PCR的問題 (新手>.<)
請問我在做first strand cDNA 用來當real time PCR的template
我是取 5μg 的RNA
而依造protocol是要用 "200 U" 的 Reverse transcriptase來做
但是我用的是每 λ "10 U"的 AMV Reverse transcriptase 只取 1λ
最後總體積會變成20λ
之後我再把總體積補到 100λ
會變成5μg / 100λ 濃度的 cDNA 嗎????
因為我用的是只有10 U 的enzyme
而Real time PCR的template (cDNA) 是50 ng
我怕因為enzyme活性的不同會影響cDNA的量
不好意思
寫的很亂 >.<
希望有人看的懂 >.<
謝謝喔
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