[問題]PCR批不出東西

看板Biotech (生命科學)作者 (Cheer up!!!)時間19年前 (2006/09/23 23:00), 編輯推噓5(501)
留言6則, 5人參與, 最新討論串1/1
身為一個研究生...有些實驗做不出來也是很合理的...冏 這陣子開始在clone一個gene 是以cDNA當作template去做PCR 一開始測condition時p了兩三次都有p到我要的片段 但是我開始要做clone時同樣的condition卻p不出來了...冏rz annealing溫度降了10度多還是p不到band...不然就是band弱到幾乎沒有 目前已測試過cDNA,taq buffer, primer, dNTP, taq都沒問題.. 這是卡到陰嗎...(/‵Д′)/~ ╧╧ 有版友發生過類似的情形嗎?? 是如何解決的呢? -- 還是連primer stock都壞了? 應該沒這麼衰吧.... -- 我的暗黑圖片收藏 http://www.wretch.cc/album/album.php?id=suny&book=4 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.72.204.94

09/24 00:59, , 1F
如何知道primer沒有問題?
09/24 00:59, 1F

09/24 11:21, , 2F
我有重新從stock稀釋..跟之前曾p出來過的測試過
09/24 11:21, 2F

09/24 11:22, , 3F
而且primer stock是這一個月才定的...現在就壞有點離譜
09/24 11:22, 3F

09/24 21:20, , 4F
機器壞了? 我有遇過這種的....orz
09/24 21:20, 4F

09/25 01:31, , 5F
有沒有想過水的問題....
09/25 01:31, 5F

09/27 20:24, , 6F
建議 做nested試看看
09/27 20:24, 6F
文章代碼(AID): #155KmaQ1 (Biotech)
文章代碼(AID): #155KmaQ1 (Biotech)