[問題] 有人用過Hygromycin來選擇transfectant嗎?

看板Biotech (生命科學)作者 (寧靜小城)時間19年前 (2006/09/28 10:06), 編輯推噓1(100)
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請問有人用過Hygromycin B來選擇NIH 3T3或其他老鼠的細胞嗎? 這個抗生素對細胞的毒性好像比G418還要強很多 我在做transfection之前已經做了kill curve 用未transfect的細胞在12-well dish試了12個不同的hygromycin B濃度 找出能讓在五到七天內能讓>90%細胞死亡的最低濃度 大約是75 ug/mL 然後我將construct電衝進細胞,讓細胞在antibiotics-free medium養兩天後 開始selection,我也在大約在四到五天後看到massive cell death, 今天是第七天,我是有看到有活著的細胞, 但是size變小, 形狀看起來也不是很健康 我很擔心這些細胞到最後也會死掉,然後我什麼clone都挑不到 所以請有經驗的專家幫忙了,感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 128.138.41.199

09/28 10:44, , 1F
我們是用50ug/ml for PC12(大鼠嗜鉻細胞)
09/28 10:44, 1F
文章代碼(AID): #156ou96R (Biotech)
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