Re: [問題] 請問真菌的活性
看板Biotech (生命科學)作者fjubiology (Science閱讀俱樂部)時間19年前 (2006/10/14 19:18)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串2/2 (看更多)
※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之銘言:
: 我想請問有在做真菌培養再萃取其代謝物質的大大們
: 是否有過將真菌培養一段時間後
: 跑HPLC來確定裡面的代謝物質種類
: 卻發現原本存在的物質反而不見了@@
: 是否是因為真菌的活性降低了呢?
: 是因為我ㄧ直將其繼代培養的關係嗎??
: 此時是否應該重新從原始plate上活化呢?
: THX^^
菌或細胞在每一次生長分裂時都會老化,或是突變,最終造成細胞的生理或代謝活性
產生變化。
我想最好的方式就是一拿到細胞,菌株時先大量培養到細胞生長穩定,然後將細胞或
菌株分管編號凍起來起來,這就是細胞庫(cell bank)。
要養細胞時,取出一管培養,我的習慣是會將此管細胞大量培養一部分作幾代的培養
實驗一部分再標號凍起起來,成為二級細胞庫。
這樣的做法可以確保細胞株的特性較接近原始細胞株特性,養個幾代實驗後再解凍我
的二級細胞庫,因為二級細胞庫的細胞都是來自於同一次細胞培養,所以特性會相同。
圖示:
原始細胞株:經培養分別凍成數管,剩下的作實驗,幾代後丟棄
P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10...
剩下的作實驗,幾代後丟棄。要再作實驗時,將P1解凍培養分別凍成數管,剩下的作實
驗,幾代後丟棄。 二級細胞庫:P1-1 P1-2 P1-3 P1-4.....
等到P1二級細胞庫用完,再解凍P2重複上述動作。
作實驗那麼多年,看到有許多人一株細胞養了好幾代,代數都超過細胞株來源建議的
代數。
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