Re: [問題] 如何將Biotin 連結到DNA上??
※ 引述《milkpa (風中狂歌的傻子)》之銘言：
: ※ 引述《zeratul1396 (薩加利亞)》之銘言：
: : 小弟因為一些實驗上的需求,
: : 必須在DNA上標定biotin
: : 但是市售的biotin label 的DNA 都很貴,而且太短
: : 請問大家都是如何在DNA上 label biotin的??
: 有kit
: 但是一組大約也是要一萬多
: 如果需要量比較大還是label到primer再PCR比較好
不會啦
roche 比較貴
ambion 就便宜多了
價錢大概是roche 一半吧
印象中 labeling kit 好像只要 4xxx 元 for 25 rxn (不太記得是幾個 rxn)
不過省一點通常可以用超過 25 rxn
可以找紫外光問一下
biotin 滿多家的，不限roche有出
biotin 的話除了 pcr labeling 以外
還可以用 chemical link 方式，不過個人覺得 sensitivity 有差
pcr 的當然是強很多
如果真的想要省錢的話，可以買terminal transferase + biotin-dUTP
(之類的，年代久遠不復記憶)
自己看一下 3'-terminal biotinylation 的方法
其實也滿簡單的，就是把東西加一加丟 37度水浴槽之後再純化就可以了
不過我之前試過 efficiency 真的差很多就是了
除非量多到爆點的程度
否則還是乖乖的用 pcr labeling kit 吧...
PS 以前試過用普通的 taq 做 dig-labeling，結果是ok 的，不過效率非常差...
但是還是有 signal喔
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◆ From: 61.216.7.199
※ 編輯: Liebesleid 來自: 61.216.7.199 (01/17 01:52)
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