Re: [求救] SDS-PAGE smear問題!?
※ 引述《NightAmades (夜)》之銘言:
: 請教各位大大~
: 我run的SDS-PAGE,stacking gel是5%,running gel是10%
: 我這幾次跑的結果都出現嚴重的smear狀況!
: marker沒有smear,感覺像是sample處理過程的問題!
: 而我portein sample是分別用Triton X-114以及
: SDS-PAGE sample buffer翠取的!
: 不知道有哪些因素或是可能性,會造成如此smear的產生??
sample處理過程的問題...load量太多也會有smear
sample bfr.太濃也會(例如...5X變1.7X)或是glycerol太多....
另外...sample中鹽類濃度太高也會影響.....
電壓用100左右就好了...
有時煮過久...水氣蒸發太多...
有一些沈澱產生...就算再完全回溶...也會影響
(其實像涮涮鍋一樣..滾水燙個3~4分鐘就夠了)
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