[問題] 請問有沒有人在做protein上的醣染色
現在在做蛋白上的醣染
就是在跑完SDS PAGE後針對Glycoprotein做染色
使用的是 PIERCE GelCode系列 Glycoprotein staining kit
產品如下
http://www.piercenet.com/Objects/View.cfm?type=ProductFamily&ID=02051020
簡單來說就是將膠先用methamol固定,
再將背景buffer置換成醋酸,
氧化,染色,還原,
以水洗過之後
再置於醋酸中(保存)。
理論上在還原劑下去之後是中止反應,
具有醣修飾的蛋白會被染成洋紅色。
我們的確也在最後完成的時候可以看見清楚的band,
但在用玻璃紙封膠的完畢乾燥之後,
整塊膠都變成一桶洛神花茶一樣的深桃紅色 ( ̄□ ̄|||)a
在試過幾次之後
因為曾經有一次不小心讓膠在水裡多放了10幾秒
發現膠變成淡淡的粉紅色
所以我們猜想應該跟水有關係....
到後來就乾脆直接用醋酸封膠,
然後還是得到深桃紅的膠.....
詭異的是,曾經有兩個前輩做過這實驗,
卻是淺淺的粉紅色背景。
但是他們表示就是照著protocal做沒有更改什麼
@@....
不知道有沒有哪位版友做過類似實驗的,可以提供點意見嗎?
感激不盡。
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