Re: [問題]無法完全螯合His tag column 鎳離子

看板Biotech (生命科學)作者 (Giuseppe)時間19年前 (2007/03/29 15:12), 編輯推噓0(002)
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※ 引述《giuseppe (Giuseppe)》之銘言: : 我在做完整個蛋白質純化後,最後以strip buffer (200mM EDTA)流洗 : 剛開始第一次使用column時可完全去除resin上之藍色鎳離子使最後resin上 : 呈現純白色。 : 但第二次使用後發現strip buffer無法完全去除藍色, : 感覺還有些微鎳離子還結合在上面。 : 我有試過用3M NaOH 流洗 好像有少一點(不知道是心理作用還是真的) : 不過還是無法像一開始用那樣呈現純白。 : 我charge buffer 的鎳離子是以NiSO4 配製的不知道有沒有差。 : 有誰跟我一樣情況或有任何解決方法的嗎? sorry 寫錯 是0.5 M NaOH NiSO4 為400mM -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.121.155.191

03/29 19:49, , 1F
只要把EDTA濃度提高到1M或2M,保證純白!
03/29 19:49, 1F

03/30 14:00, , 2F
感謝大家
03/30 14:00, 2F
文章代碼(AID): #162sRMQg (Biotech)
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