[問題] RNAi knock down
不好意思,又是我,本來要跟上面那篇一起的,
可是問題好像不太一樣,所以開新的一篇。
還有一個問題想請教大家,
現在在做 knock-down, 用 pSuper,
想請問一下,要多久才能看到knock down 阿?
24 hrs 會太短嘛?我看papers 都是3-5 days,
但是我想問說通常transfection後,大概多久之後會開始knock-down。
還有,我現在做是用immunostaining,然後再用ImageJ量signal intensity,
看看有沒有減少,不過這樣感覺好像少了什麼。
除了Western blot之外還有其它方法知道到底有沒有成功knock-down 嘛?
因為我做RNAi主要是想確定我的Ab 是對的,是specific to my protein,
如果intensity 有減少代表Ab沒錯,問題是Ab要很concentrate才能在WB顯現,
做WB的話會用掉很多很多Ab....
不知道大家通常是怎麼確定有沒有knock down 成功。
感謝。
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夢想和現實是有距離的。
一切都將重新開始....
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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