[問題] 萃取DNA

看板Biotech (生命科學)作者 (Anita才是王道)時間19年前 (2007/04/02 19:28), 編輯推噓5(508)
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關於萃取DNA時 如果最後沒將酒精完全揮發 pellet沒有完全乾燥就回溶 會影響PCR的結果嗎 因為老闆給我的Protocol是讓pellet自然晾乾(室溫20min) 但每次幾乎都沒乾過 = =||| 然後電泳看DNA quality 都出現一陀的亮帶兼smear...(不sharp) PCR的結果也就時好時壞(同樣條件去跑) 請問各位高手 這個步驟出差錯會產生什麼結果 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.226.53.216

04/02 19:58, , 1F
其實沒有很乾沒關西,對PCR來講是看你的DNA純度,酒精有댠
04/02 19:58, 1F

04/02 19:59, , 2F
餘一點點,其實影響不太!
04/02 19:59, 2F

04/02 20:06, , 3F
若你認為你的DNA不夠純的話,你可以把回溶的DNA在98度C
04/02 20:06, 3F

04/02 20:07, , 4F
加熱3 min,在離13200rpm約5~10 min,然後把上清液吸上來
04/02 20:07, 4F

04/02 20:08, , 5F
丟掉沉澱物,上清液就再當你的DNA吧
04/02 20:08, 5F

04/02 23:22, , 6F
老闆是跟我說過可能會跑不出來...你先跑跑看吧^^
04/02 23:22, 6F

04/02 23:22, , 7F
我曾經幹過同樣的事...不應該說我根本忘記烘乾...那次確뤠
04/02 23:22, 7F

04/02 23:23, , 8F
實也P的不好...但是也只是推測...因為我用的primer也還在
04/02 23:23, 8F

04/02 23:25, , 9F
測試...並不專一
04/02 23:25, 9F

04/03 09:53, , 10F
QIAGEN....
04/03 09:53, 10F

04/03 09:53, , 11F
sorry 我是回下一篇
04/03 09:53, 11F

04/04 19:13, , 12F
我是放入烘箱15MIN 或是空管離心13000rpm3min
04/04 19:13, 12F

04/04 19:19, , 13F
pcr的產物有可能會亂亂的。不然就把denature 的時間加長看갠
04/04 19:19, 13F
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