Re: [問題] 限制霉實驗的問題...........
※ 引述《Highwind (小羊回來了)》之銘言:
: ※ 引述《ppta (幸福的瞬間)》之銘言:
: : 請問一下,我看學長之前的論文,做限制脢實驗,加的各試劑的量有分PCR產物強跟PCR產
: : 物弱,請問一般大家在實驗的時候,是怎麼先知道PCR產物強弱的?另外,PCR產物等要
: : 加多少怎麼決定?而限制脢加多少怎麼決定?要反應多久怎麼決定?
: : 是不是PCR產物、限制脢量、反應時間有一個比例關係,而且跟限制脢的單位切割長度有
: : 關?那要怎麼算出這些量呢?
: 理論是理論,但端看種類而定,不同廠牌影響也很大,新舊也有關
有理論嗎?能教一下嗎?因為我實在是菜鳥。
: : 再問一下,限制脢是不是可以切久(比方超過一個理想時間),但是不能夠切不足時間。
: : 所以時間的話,愈久沒關係。
: 你切的目的是要做什麼
: RFLP?construct?
我做的基因都是別人做過的基因了,我要用RFLP的方式來確認研究對象的型別。
: : 學長現在出國了,所以沒辦法問學長,而且我做的基因位置跟他不一樣,請求各位高手幫
: : 忙,謝謝
: 就試呀!實驗就是試了失敗,想一想又試
: 不知道時間就固定unit做time-dependent
: 如果效果不彰看要不要加BSA
我拆了其中一個看,我看裡面就有加BSA耶,我以為需不需要BSA,它自己會調好不是?
: 不確定位置就load一個不切
: 如果覺得怪就去要一個plasmid來做對照
: 另外PCR強弱是能最佳化的
前三句看不大懂耶......只是要看型別也要做前三句的測試嗎?
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