[問題] live cell image??
各位先進好
小妹最近開始想做confocal
得到的資訊大多是fix細胞的步驟
可是我想要做那種看到protein internalization然後被derade掉的
所以要做活細胞影像
不過有幾個問題 想問一下有做過的人
我的細胞是suspension cell
我想看的是cKit (RTK) mutant 他會自動林酸化然後turn over
加藥物之後 cKit會不穩定然後 cKit expression就消失了(on western)
想請問一下 1. 活細胞影像的fix 還有打洞 使用的Material ??
如果是fix的細胞 是4% paraformadehye + 0.5% Triton X100
活細胞要用啥ㄌㄟ ?? 又不會弄死細胞又可以intracellular stain的
2. 如果我有抗體bind cKit -->會不會影響他internalization??
我不清楚我的抗體會部會block cKit function yet...
先這樣..感恩....請各位先進給點意見
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