Re: [問題] 可以推薦哪家的His-tag蛋白純化系統比렠…
看板Biotech (生命科學)作者Liebesleid (je suis desolee ...)時間19年前 (2007/05/23 01:21)推噓2(2推 0噓 0→)留言2則, 2人參與討論串1/2 (看更多)
※ 引述《transmore (小次郎)》之銘言:
: 最近要開始純化重組的蛋白
: 我是使用6XHis-tag的融合蛋白
: 老板應該是偏好傳統重力流動式的
: 那些spin的、Disk的..他應該不喜歡
: (如果效果很好也請推薦一下)
其實用gravity就夠了
反正你就擺著慢慢流,說實話也不會多多少時間
反而不用平衡、不用拿來拿去,比較方便
像平常我做純化大概是 1L culture --> 160mL sample
過 column (平衡 loading wash elution) 大概也不用一小時吧
反而最耗時間的是在破菌的時候,我們的 sonicator 真是超級爛。
不知道有沒有版友可以推一下 (跪謝)
: 想請問在做6xHis-tag protein純化的各位
: 請問一下你們使用的column、resin or kit
: 是使用哪個牌子哪個代理商的?
: 效果好嗎?價錢便宜嗎?resin可以重複使用嗎?
: 感謝各位先進^^
我自己是用 BD Talon resin 的... 是只買 resin,所有的東西都自己配
不過買 resin 沒有送那個管子,所以要和隔壁實驗室要一下
因為管子我問到的最小包裝是 pharmacia 的... 50/package = =
效果滿不錯的,雖然現在的主流是 Ni-NTA (qiagen)
當然 ni-nta 是很強啦,但是也很貴 T_T 個人覺得一般來說,如果 protein 不是太難做
或是實驗室真的很有錢... 那用 talon 的就夠了, nt 4000/10mL
resin 可以重覆用啊,只要操作小心,我想用到地老天荒應該沒什麼問題
重點是要注意有沒有塞住 (灰塵或是菌的 pellet),還有保存之類的
然後我的 buffer 都會滅一下菌啦,怕 buffer 不乾淨可能會發黴什麼的。
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