[問題]用核蛋白做ip的問題...
先說說抽nuclear protein的方法
就是用hypotonic buffer先弄破細胞,分離出核
再用high salt extraction buffer去抽取核蛋白
但取出核蛋白後
不論是cytoplasma fraction 或nuclear fraction
想要的蛋白都沒辦法用proteinA/G抓下來
大部分都還留再上清液裡
ip方法應該ok,因為其他人做不同sample做的出來
曾想過是不是salt concentration太高
但連cytoplasma fraction都沒有做出來
想說是不是有什麼其他問題?
有人用nuclear protein做ip嗎?
可以分享一下經驗嗎?
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