[問題] 抽plasmid 失敗好幾次了

看板Biotech (生命科學)作者 (12)時間19年前 (2007/07/10 18:49), 編輯推噓6(602)
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最近抽plasmid 測出來的260/280都好高 最高到2.3 而且plasmid的濃度都是之前的好幾倍 想說是不是菌養太多了,使的RNAse 作用不夠力 才會讓ratio過高 想請問大家起初在挑colony 的時候 ,都是先在LB agar上面養多久阿? 挑多大的colony呢? 我用的是GIAGEN MAXI 之前抽出來都可以用,最近已經失敗好幾次 所上8月底要review,抽不到plasmid根本不能做實驗 請大家幫忙我了 拜託!! 謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.9.1

07/10 20:21, , 1F
Qiagen? 這家東西應該ok才是 260/280好高 不代表沒抽到
07/10 20:21, 1F

07/10 20:22, , 2F
怎不做實驗看看 還是做了有問題?
07/10 20:22, 2F

07/10 20:50, , 3F
Giagen....not qiagen
07/10 20:50, 3F

07/10 21:20, , 4F
抽出來的PLASMID,transfect的效率變差.....
07/10 21:20, 4F

07/11 08:03, , 5F
除了OD還可以跑gel相對定量,同時也會知道你的plasmid掛了
07/11 08:03, 5F

07/11 10:16, , 6F
我是kit是Qiagen...不好意思打錯了...
07/11 10:16, 6F

07/11 12:15, , 7F
Giagen 是有點難念...菌養太多了 你會覺得一開使離心
07/11 12:15, 7F

07/11 12:16, , 8F
pellet有比較大嗎?...真的RNA太多 就加多點RNAse
07/11 12:16, 8F
文章代碼(AID): #16asGbwD (Biotech)
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