[問題] kupffer cell primary culture
請問有人做過kupffer cell primary culture嗎?
我參照其它paper的protocol分離下來的細胞量並不理想
我的方法是先將大鼠肝臟以生理食鹽水灌流去除紅血球
接著再將肝臟取下來以 PBS + collagenase IV游離細胞
(也有其他paper是將collagenase IV灌入肝臟分解 何種較好?)
將游離的細胞離心去除其他組織碎屑後
放入percoll分離細胞(想請問有人熟悉用法嗎?)
最後分離下來的細胞也沒有很明顯的分層
想請問是否是離心的轉速及時間太短(400g 20min)
如果有人做過kupffer cell primary culture
可以傳授一下經驗嗎?
謝謝~
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