[求救] 想請問cloning～～已看過精華區
最近在construst碰到了一些之前沒碰到的問題！
想請問一下！
insert size:6K
已接上pGEMT-Easy上，抽取maxi後，以RE digestion(double cut)，
有確認RE是有work的。作了gel extraction，
將insert切下，欲接入的vector size:5.4K
ligation insert:vector用-3:1
是用電的，也確認competent cell與transformation efficiency也ok，
至少都有10的9次方。
但是，在我有加ligase(promega)的組別中發現長出colone數目低於沒有加的，
所以，想知道是不是ligase會抑制colone生長，
同時，我還想check我的ligase是否有work。
所以現在想設計check的實驗，
打算利用single cut vector以有加入ligase and no liogase組別
transformation後，來check。
不知這樣是否足夠？
謝謝！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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