[求救] 想請問關於sonication

看板Biotech (生命科學)作者 (阿矇)時間18年前 (2007/11/07 01:19), 編輯推噓2(203)
留言5則, 2人參與, 最新討論串1/1
我目前遇到一個很奇怪的問題 我目前的protein是soluble的 在我induction完後我會先進行一次SDS PAGE分析看是否誘導成功 而目前我遇到的情況都是: 1. induction完後我會取一些樣本先進行sonication看是否成功誘導出soluble product 我取OD600 = 1的菌 1ml 離心後加入400 microliter的binding bf做sonication 打一秒停一秒共打三分鐘 ------->可看到明顯的soluble protein 2.當我放心的將所有induction的菌(200c.c)加入20c.c的binding bf中打( 打一秒停一秒 共打六分)後卻發現.....完全不見我要的soluble product.... 怎麼會這樣....有哪位大神有經驗的嗎....orz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.55.220

11/07 01:47, , 1F
我一次都打五秒耶 不知道是不是強度的問題
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from 1 表示你的protein有被induce出來
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11/07 01:48, , 3F
你有先破菌嗎?
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11/07 01:48, , 4F
比如說 加完binding buff後 冷熱個幾次
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11/07 23:03, , 5F
你打的不夠久吧 體積加大時間要拉長阿 怕沒破
11/07 23:03, 5F
文章代碼(AID): #17CA8L3Z (Biotech)
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