[求救] 關於stable transfection的問題....

看板Biotech (生命科學)作者 (\笨小孩)時間18年前 (2007/11/14 21:28), 編輯推噓7(703)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/1
利用transient transfection將expression vector(抗G418)送入後 (跑western 確定有送入) 已經用不同濃度gradient G418來篩選 不管用哪一種濃度的G418篩選 細胞總會出現狀態不好(細胞皺縮.....等) 與正常健康細胞不太相同 我還要繼續篩下去嗎?!@@真猶豫... 各位大大會出現此種細胞狀況不好的情形嗎?.......囧 p.s第一次做stable clone.....就遇到瓶頸>"< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.117.188.9

11/14 21:29, , 1F
stable clone不是那麼好做的~加油xd
11/14 21:29, 1F

11/14 23:12, , 2F
出現"此種"細胞狀況不好...是那一種? 沒交代是沒人救得了的
11/14 23:12, 2F

11/14 23:25, , 3F
細胞株是用 CL1-5.....肺腺癌細胞
11/14 23:25, 3F

11/15 00:07, , 4F
本實驗室篩出的 stable clone和 parent cell也是長的不一
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11/15 00:08, , 5F
樣,而且養久了就換新的細胞,因為他變了
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11/15 00:24, , 6F
這應該是楊院長家都要用的cell去那請問一下比較快
11/15 00:24, 6F

11/15 20:54, , 7F
有試試沒有transfect的細胞單獨加G418嗎?
11/15 20:54, 7F

11/15 22:20, , 8F
有......細胞在約4天到7天,每天都有細胞飄起來....
11/15 22:20, 8F

11/15 22:24, , 9F
直到沒有細胞....
11/15 22:24, 9F

11/15 22:24, , 10F
不過學姐有叫我在挑stable clone約第7天改用20%FBS medium
11/15 22:24, 10F
文章代碼(AID): #17ElVd_R (Biotech)
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