[求救]有關CELL VIABILITY的實驗

看板Biotech (生命科學)作者jl4944 (白毛)時間18年前 (2008/02/15 23:19)推噓1(1推 0噓 2→)

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目前我的實驗是在做小腦萎縮症第八型(SCA8) 我想建立一個CELL MODEL也就是找出SCA8的細胞phenotype 我有三個細胞株:HT(正常人),23R(帶原者),157R(病人) 照理說157R的死亡率應該明顯得比較高我第一個實驗是FLOW 藉以觀察細胞週期的變化藉由STS(STAROUSPORINE)來誘導細胞凋亡但是STS使整個細胞週期變得很亂所以就改方法第二個實驗是用最基本的Trypan blue assay HT 23R 157R 交叉STS四種濃度(0 15 30 50) 但是卻一樣沒有結果有幾次DATA還顯示157R配上最濃的STS細胞死亡率還比較低所以真得是非常得令人困惑懇請各位大大幫我想想有哪裡出問題了我列一些在Trypan blue assay也許的問題點 1.從MEDIUM就可以看出來157R吸收較多的養分長得比較快但是再計算細胞時卻沒較多而且越後面還有打不散的情況 2.要將細胞打起來計算時我是先全部先打起來那是不是要算的時候再打起來(打一孔算一孔)會比較好並且我只用原本的MEDIUM沖而已是否需要改善 3.STS是否適合誘導有其他藥劑較合適嗎? 拜託各位大大幫小的解惑如有看不懂的地方可以指出感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.166.41.150