[求救]請問,為什麼使用lysis buffer要在冰上阿???常溫不行嗎??

看板Biotech (生命科學)作者 (紅豆)時間18年前 (2008/02/21 16:38), 編輯推噓3(3010)
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想請問各位前輩幾個問題,拜託了Orz 疑問一, 為什麼使用Lysis buffer 要在冰上或4度下與細胞作用阿?常溫下不能嗎? 疑問二,那麼大家都把配好的lysis buffer儲存在4度C冰箱嗎?(我是這麼做的) 疑問三,關於板上有很多前輩都是自己配lysis buffer的,但在配完後,怎麼知道自己 配的lysisi buffer 準確性跟效果到底算好還是不好呢,畢竟跟買的kit相比較 下,kit會貴一定有它的效果在,所以很懷疑自己配出來的真的能用嗎??? 以上幾個問題拜託各位學長,學姐,同學替我解答,非常謝謝您^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.118.6.103

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Q1:應該是跟protease有關
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Q2:我覺得放室溫也可以(反正protease inhibitor是現加)
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不過反正lyse cell時要低溫 那乾脆buffer放冰箱
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Q3:很簡單,你lyse完離心 取pellet和sup去跑PAGE做WB就知道
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lysis buffer又不是很難配的東西..kit也不是貴在這裡
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要是kit貴在這裡的話他一定不會公開配方給你的..
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因為你原本是nature的狀態..你的protease也還是有功能
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所以盡量4度c操作..至於儲存..就方便阿..可以直接拿就用
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還有大多kit的lysis buffer都公開配方還幫你算好好的
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不會有不能用的問題= =..
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買lysis buffer的lab 可能沒有錢買那麼多試劑吧!或許不是常
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做的實驗 只做幾次OK就好..當然也有可能是實驗室太有錢了:p
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02/21 18:25, , 13F
如果實驗設計沒問題 buffer也沒配錯 還沒看過跑不出來的!
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文章代碼(AID): #17lJXkr- (Biotech)
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