[求救] 請問這些步驟理論正確嗎?
1.將細胞溶於有蛋白ㄇㄟˊ抑制劑的緩衝液中，於室溫與液氮罐中反復凍融2次。
(此步驟細胞裂解，細胞內物質釋出)
2.勻漿4度C 600g離心10min。(上清液含細胞膜、線粒體細胞溶膠。沉澱中有未破碎的細
胞及細胞核。棄沉澱)
3.上清液4度C 8000g離心10min，棄沉澱。(沉澱線粒體)
4.上清液4度C 10000g離心20min，棄上清液。(沉澱為所要之細胞膜碎片)
還有請問打破細胞 利用反覆凍融法的話可行嗎??
會不會讓細胞膜破得太碎?? 因為想取得膜上蛋白所以不想太碎
還是超音波震盪比較好??
我們的sample是人類的癌細胞
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.189.49
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
