[求救] 有關上flow前的酒精固定

看板Biotech (生命科學)作者 (真的是太吸引人了)時間18年前 (2008/03/11 23:45), 編輯推噓3(305)
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大家好 我想請問一下有在做flow的版友們 當用70%酒精固定cell時 是不是很不容易把cell均質呢?? 我目前的做法是在細胞wash後離心取pellet時 留下約200~250ul的PBS不吸光 接著votex把pellet均質後 再加入95%酒精700ul 這樣子final剛好是70% 同時cell也比較容易均質 不過還是多多少少會看到一些沒有打散掉的pellet ~"~ 請問一下這個狀況是正常的嗎?? 以及我的這個固定的手法合不合理呢?? 謝謝各位 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.90.33

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之後去除酒精還是要離心變pellet...
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忘了說 我是完全抽乾後再加入PBS 然後pipetting稍
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微沖散 再把EtOH一小滴一小滴慢慢低入後在用pipette
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混合均勻 沒有殘留pellet的問題- -a 細胞數大概80萬
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(反正跑flow細胞不用太多 太多沒打散還會黏管)
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我的作法也是跟原PO類似 我認為這樣的效果比較好 而且加酒
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必須同時緩慢的vortex sample tube
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了解了 我會再加入酒精的時候同時vortex 謝謝樓上兩位喔^^
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文章代碼(AID): #17rgaEJM (Biotech)
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