[求救] semi-quantitative PCR的問題><
在跑RT-PCR之前
我有將兩個樣品的cDNA
都以分光光度計定量到O.D = 1
我不確定這樣做對不對
但 畢竟要比較兩個樣品基因表現量
template量也要一樣多
所以我唯一想到快又方便的方法 就是這樣定量了
結果跑出來
actin (housekeeping gene)
A樣品產物超多
B樣品還好
而target基因
A樣品有表現
B樣品則完全無條帶
如此結果 應該說明template量不同所造成差異..
想請問大家
接下來我該如何做?
看樣子分光光度計似乎無法定量
或是 我應該看A樣品actin的亮度
慢慢加B樣品cDNA的量?
實驗室還沒有人做過semi quantitative PCR
所以 我只能來版上請教大家了
先謝謝回覆~^^
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