[求救]冷凍切片及一些免疫組織染色相關

看板Biotech (生命科學)作者 (俏)時間18年前 (2008/04/15 23:06), 編輯推噓4(407)
留言11則, 4人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
想請問板上的版友 小弟是做冷凍切片 切完sample後 會先把片子放在-20度冰箱 隔天做染色 染色前 我會先讓片子降至室溫 浸入Xylene 再以酒精覆水(100%->50%) 接著就是我的染色了 染色後 會發現我的支架會脫落 不是全部 不過也脫落不少 (我是將支架植入肌肉層中 所以取出後 支架會被fibrous tissue包覆住) 所以染色後 外圍的tissue可以被染出來 不過中間的支架會有部份被洗掉 請問有啥辦法可以盡量避免我的sample被洗掉嗎? 另外... 想請問一下 做免疫組織染色時 會用一種溶液做Blocking 請問Blocking是要做啥的呢? 麻煩解答了 感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.224.54.62

04/16 09:45, , 1F
通常blocking是為了阻絕抗體的不專一性結合~
04/16 09:45, 1F

04/16 11:42, , 2F
不知道你浸入冷凍切片染色前浸Xylene的用意是?
04/16 11:42, 2F

04/16 11:43, , 3F
建議找個IHC完整protocol(含原理)讀,我記得abcam網站上可下載
04/16 11:43, 3F

04/16 22:04, , 4F
因為我問賣包埋劑的sales 他跟我說要用xylene
04/16 22:04, 4F

04/16 22:05, , 5F
要不然會洗不乾淨 我也覺得怪怪的 所以問問板上的各位
04/16 22:05, 5F

04/17 10:29, , 6F
他說的是 封片前要用Xylene
04/17 10:29, 6F

04/17 12:32, , 7F
我有明確問他 他說是染色前 不是封片前
04/17 12:32, 7F

04/17 21:25, , 8F
到目前沒看過這種protocol,建議你照一般步驟做觀察實驗的情況
04/17 21:25, 8F

04/17 21:27, , 9F
如果做得出來,protocol可以再微調細節,讓結果更漂亮清楚,
04/17 21:27, 9F

04/17 21:27, , 10F
而且個人懷疑Xylene的步驟可能與你提到的"洗掉"有關(純猜測)
04/17 21:27, 10F

04/17 23:41, , 11F
好~ 我會試試 感謝鼎力說明 ^O^
04/17 23:41, 11F
文章代碼(AID): #181CI9dp (Biotech)
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