Re: [求救] SYPRO Ruby染色問題!?

看板Biotech (生命科學)作者leoblack (朋友看太重的猫)時間18年前 (2008/04/29 00:32)推噓2(2推 0噓 8→)

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: ◆ From: 140.127.160.142 : 推 leoblack:用reuse的Sypro Ruby真的會有色素沈澱~換新的就ok了 04/28 15:17 : → leoblack:我們家作CoIP也是用Sypro Ruby染色~每次都會用新的 04/28 15:18 : → leoblack:另外,我們都會包頭巾帶手套口罩,減少灰塵跟keratin的沾粘 04/28 15:18 : → leoblack:如果還是不能改善~恐怕得從"配膠跑膠"那邊下手,想辦法用 04/28 15:19 : → leoblack:乾淨一點的Q水or buffer來配~fix時也用乾淨的盒子盛裝~ 04/28 15:20 : → NightAmades:我用新的也是會有胡椒顆粒~>"< 04/28 22:04 : → NightAmades:盒子都會用洗乾淨的盒子..buffer也是用二次水配 04/28 22:04 : → NightAmades:嗯...會試試看戴頭巾..及口罩 04/28 22:05 : → NightAmades:不過...染的時候用微波爐的方式跟O/N 哪個比較好!? 04/28 22:07 : → NightAmades:看產品protocol說用微波爐會比較少胡椒顆粒~ 04/28 22:08 : → NightAmades:再請問leo大..您都完全不會出現胡椒顆粒嗎? 04/28 22:10 : → NightAmades:不知道SYPRO Ruby的廠牌會不會有影響!?...我用萊富的~ 04/28 22:11 我不敢說"完全沒有胡椒顆粒" 但是我會盡可能地想辦法減少 http://www.wretch.cc/album/show.php?i=leowind&b=2&f=1091764481&p=1 但是我看不懂什麼是微波爐?!^^" 我們家是將CoIP後的band跑1D膠後將我們所要的band切下來,要去送LC/MS/MS 所以有沒有東西沾粘上PAGE對我們而言很重要所以我們會用乾淨的容器盛裝(如裝6 well dish的塑膠盒) 以保鮮膜罩著,然後fix(40%MtOH+10%Acetate)跟wash(Q水) 染Sypro Ruby時會在4℃ o/n(怕protein degrade) 要確定PAGE在裡面可以自由滑動,且不會接觸到保鮮膜,也不會"擱淺" 不然一樣會有色素沈澱等染完後會用Q水再wash一次,然後再用fix buffer destain 再用Q水wash 2次,換乾淨的Q水後放於4℃冰箱我們家invetrogen跟sigma的都有在用,效果都還ok~ 使用前不會特別濾過或什麼的~就直接倒來用了~ 希望這樣講對你來說有幫助~^^" -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.22