Re: [求救] SDS-PAGE dye往上浮
感謝各位大大的解答,
後來發現確實是因為0.1M ammonium acetate(高鹽度)的關係造成
glycerol比重不足而往上飄,
所以我就將sample和 sample buffer和agarose混合成 0.5%左右的mixture,
加熱冷卻再稍微加熱溶解後趁還沒凝固就注入well
凝固後就不怕他飄出了了^_^
後來就一切順利了, 給大家參考, 也許遇到類似的情況可以試一試^^
謝謝大家, 這裡都是好人:)
※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：
: ※ 引述《mason.bbs@ptt.cc (牲牲不息)》之銘言：
: > 我的sample 是溶在 0.1M Ammonium acetate
: > 加了sample buffer 然後 Load 進 well 都還正常
: > 在要通電跑膠前會先用 running buffer 補滿well
: > 問題來了
: > 除了Marker 的藍色是沉澱的外,
: > 我的sample well的藍色solution 都浮了起來
: > 使我不敢繼續補滿,
: > sample 會隨著dye會往上溢出去污染到其他的well
: > 更不敢把電泳槽架上加buffer, 會全部飄出去吧XD
: > 現在情況很囧, 有沒有人有類似的經驗可以幫幫我QQ
: > 謝謝
: 很奇怪的做法
: 你的意思是說你是先把 sample load 到空的 well （裡面只有空氣）裡面
: 然後再灌 running buffer?
: 我覺得這樣應該不對吧
: 應該是先灌滿 running buffer, 然後再 load sample
: 如果這樣還會漂的很嚴重 就是你的 sample buffer 配製不當了
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: 或者如果你說的 load 的過程裡面
: 因為設備有一些滲漏而導致 running buffer 液面下降
: 則我的習慣是先run 一下 讓 sample 都跑進 stacking gel 裡面以後再補滿
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