Re: [求救] 請問有關於FRET
: 我本身有兩個PROTEIN,
: 各接在不同的螢光蛋白上,
: 一個會發綠光,
: 一個會發紅光,
: 想看看這兩個蛋白是否會colocalization,
: 想學用顯微鏡做FRET...
我們實驗室做過的是 CFP/YFP FRET
我知道現在紅綠可以做 FRET，但是你可以要查查看你的螢光蛋白效率夠不夠好~~
: 可是問過系上老師(荷蘭人),他BRALA BRALA講了一堆,
: 結果好像被陰掉了(居然被拿去試他自己和其他老師的project,根本不想幫我)
: 雖然心有不甘,
: 可是也沒辦法,他是管學校顯微鏡的老師..
: 請問這個實驗是只有軟體部分比較難還是連顯微鏡都很特殊,都很難用??
基本上 FRET 是個相對簡單的實驗
只要能做 photo bleach，就算在普通螢光顯微鏡也可以做，也不需要活體。
: 他跟我拿了original images (當初做cotransfection在螢光顯微鏡下的照片),
: 說要做signal 比較之類的,
: 後來也沒下文....
: 另外一問,FRET可以用FIXED 玻片看嗎??
: 因為他也只跟我要玻片,
: 他們自己是用LIVE CELL在萊卡的顯微鏡下做FRET~>_<~
: 請問板上有人可以幫幫我解答這些問題嗎??
: 被當笨蛋耍的感覺真不好受@@
我建議你要有 positive control：
(1) 你可以 construct 一些已知會有 physical interaction 的蛋白
(2) 或是你可以做個 綠-紅 螢光 fusion protein，這更直接
--
這是你嗎 你要這樣的過嗎
這是你嗎 你錯過了自己吧
就這樣嗎 把你自己信仰 來換別人所謂的天堂
這是你嗎 是誰給了你框框
這是你嗎 把你自己都遺忘
你的心 畢竟是你自己的地方
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.32.9
推
06/16 12:50, , 1F
06/16 12:50, 1F
→
06/16 12:52, , 2F
06/16 12:52, 2F
→
06/16 12:53, , 3F
06/16 12:53, 3F
→
06/16 12:56, , 4F
06/16 12:56, 4F
→
06/16 12:57, , 5F
06/16 12:57, 5F
→
06/16 15:47, , 6F
06/16 15:47, 6F
推
06/17 07:15, , 7F
06/17 07:15, 7F
→
06/17 07:16, , 8F
06/17 07:16, 8F
討論串 (同標題文章)
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章