Re: [求救] 想請問測posttranslational modificati …
※ 引述《ycmi (you can make it)》之銘言:
: 想問欲利用wetern blot去測某protein的posttranslational modification,例:
: phophorylation or acetylation...etc.時,在收lysate或處理sample時,不知有
: 經驗的前輩們對於這個步驟是否該注意些什麼事情?例如,要避免什麼動作或應該
: 做什麼動作or加什麼lysis buffer等,才可以容易看到modification?或是才不會破
: 壞我想要看的現象?謝謝! :)
acetylation我不清楚,如果是要看phosphorylation,lysis buffer裡面要加
protease inhibitor, phosphatase inhibitor 像是 sodium vanadate,
PMSF, antipain.....等。當然準備的過程全程放冰上是需要的,不過煮完以後
就不要放冰上了,不然sds會沈澱。
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◆ From: 61.56.130.95
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