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Re: [求救] 請問PCR的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (上了!上了!哇哈哈)時間18年前 (2008/06/21 18:35), 編輯推噓4(4推 0噓 3→)
留言7則, 3人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
那再請問各位一下 就是P出來的結果 發現有出來兩三條Band 然後預估的size雖然也有band 但是看起來淡淡的不太亮 後來才發現是primer兩個base錯誤 請問需要重新訂購primer嗎 還是因為target是病毒的DNA,產生了突變的情形呢? ※ 引述《a64toto (上了!上了!哇哈哈)》之銘言： : 請問一下 : 如果在設計PCR primer的序列 : 總長26 mer的primer : 如果錯了兩個base,還能P的出來嗎 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.124.161.222
推
06/21 20:15, , 1F
這表示primer做錯或是品質不好 請他們重做
06/21 20:15, 1F
→
06/21 20:16, , 2F
一定要要求他們免費重新合成一次 不要傻傻的再付一次錢
06/21 20:16, 2F
→
06/21 20:17, , 3F
這種情況跟template沒有關係 100%是primer序列錯
06/21 20:17, 3F
推
06/21 23:01, , 4F
好像是設計錯的不是?
06/21 23:01, 4F
推
06/22 17:14, , 5F
喔喔 可能是我會錯意了 能定序的話先定定看吧
06/22 17:14, 5F
推
06/23 11:02, , 6F
看你PCR的目的是要做啥?不轉殖,不表現,不在轉譯區域內OK的
06/23 11:02, 6F
→
06/23 11:04, , 7F
產量變少可能是錯誤影響primer annealing或是你PCR條件不好
06/23 11:04, 7F
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