Re: [求救] 關於有螢光蛋白結合的蛋白質表現

看板Biotech (生命科學)作者tsubasawolfy (悠久の翼)時間17年前 (2008/07/05 07:22)推噓1(1推 0噓 0→)

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※ 引述《lstlst (lstlst)》之銘言： : 話說我有一個A蛋白質 : 人家給我家老師的時候,已經BINDING上紅色的CHERRY PROTEIN : 當我接手這個PROJECT時 : 我把這個A-CHERRY CONSTRUCT TRANSFECT到細胞中表現蛋白質 : 之後跑膠,TRANSFER到膜上 : 用ANTI-A ANTIBODY 去STAIN : 結果結果除了A-CHERRY CONSTRUCT 以外 : 底下又多跑出來兩條很明顯很深的BANDS : 猜想可能是A PROTEIN SEQUENCE上其他的ATG干擾 : 所以我又突變了可能的4個地方的ATG.. : 但是用ANTI-A ANTIBODY OR ANTI-CHERRY ANTIBODY最後跑出來的結果 : 那兩條深深的BAND還是陰魂不散... : 我也問老師該如何是好,我們老師也不知道那兩條BANDS該如何處理@@ : 因為這樣就可能影響顯微鏡下螢光SIGNAL不純, : 請問有人可以幫幫我嗎?? : 連要找資料都不知道要怎樣打KEY WORDS @@ 會不會是degradation form...?? 要確認這個就。。。不過要先用你們的antibody做IP... 跑完1D-SDS ->Comassive blue stain or SYBRO Ruby stain　(別用silver stain) ->pick plot (沒錢就自己拿tip插。。有錢就丟給學校或其他地方挖) ->1D gel digestion (同上) ->丟給中研院打MASS (一點才幾百塊　你兩點加起來不會破千) 看這兩個band到底是何方神聖後就比較好解決。。。 -- EVA-RETAKE══════════╬SPHRYU ASUKA LANGLEY ◣ thePainter Wenn "Liebe" heißt,dieses Versprechen bis zum Tode ▎◥ ◥ ◣ nicht zu brechen...dann verspreche ich: ◣ ▍ ▁▃▄▅▄▃◥ dich immer zu lieben,und keinen Mann außer dir, ◥◥ ▌ ▇▌ ◥▆▅◢◥ solange ich lebe.Alles an mir...von Kopf bis Fuß, ◥▋ ▋"▅ ▁ sogar jedes Haar auf meinem Kopf gehört dir. ◥ ‵▆▆▇ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 219.85.4.132 ※ 編輯: tsubasawolfy 來自: 219.85.4.132 (07/05 07:26)