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Re: [求救] transfection 的載體可以在細胞表現多久?

看板Biotech (生命科學)作者 (Goodday)時間17年前 (2008/07/15 21:11), 編輯推噓7(7推 0噓 6→)
留言13則, 5人參與, 最新討論串2/3 (看更多)
※ 引述《mzac1b (Goodday)》之銘言： : 如抬頭 : 想請問 : transfection 載體到細胞 : 可以在細胞表現幾代? 多久(幾天?)? : 感謝 比如說最近很熱門的iPS (induced pluripotent stem cells) 就是強迫成體, 已分化細胞表現 四個轉錄因子以誘導該細胞變成多能性幹細胞 大多數文章使用的方法都是用retrovirus 感染細胞的方式來強迫表現四個因子 我想問的是: 為什麼不用過度表現的方式? 過度表現不是比較方便嗎? 還是有特殊的原因所以不能用過度表現的方式? 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.55.238
推
07/15 22:55, , 1F
那你要先開啟它門被關閉的promoter吧。。
07/15 22:55, 1F
→
07/15 22:55, , 2F
還要找出為何會被關閉　以及那些調控她們表現的機制
07/15 22:55, 2F
→
07/15 22:56, , 3F
一個個去調整她們的控制機制不如直接用外來基因表現
07/15 22:56, 3F
推
07/15 23:35, , 4F
樓上應該誤解問題and原po對過表見解太侷限,retro也是其一阿
07/15 23:35, 4F
推
07/15 23:48, , 5F
我推完文後才發現原PO是認為retro是推動endo - -a
07/15 23:48, 5F
→
07/15 23:49, , 6F
不過它們應該都是用retro直接OE才對吧?
07/15 23:49, 6F
推
07/16 00:19, , 7F
但我推測原po認為retro表現為infect不算OE,對透過lipo等與
07/16 00:19, 7F
→
07/16 00:23, , 8F
plasmid的方式transfect才是,可是已分化細胞也是很挑剔的
07/16 00:23, 8F
推
07/16 02:41, , 9F
Retrovirus可以嵌入genome,infection rate很高,你如果同時要
07/16 02:41, 9F
→
07/16 02:43, , 10F
時要表現四種protein,又要傳幾代下去 沒有什麼別的方法好選
07/16 02:43, 10F
推
07/16 03:11, , 11F
硬是要用transfection作4個gene的cell line也不是不行啦
07/16 03:11, 11F
→
07/16 03:11, , 12F
只是要做到地老天荒而已 XD
07/16 03:11, 12F
推
07/16 11:15, , 13F
做到最後到底是弄出幹細胞還是癌細胞還是一個問題..
07/16 11:15, 13F
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