[問題] 限制 酉每 保有活性的時間?

看板Biotech (生命科學)作者 (╮(╯_╰)╭)時間17年前 (2008/09/21 20:03), 編輯推噓4(405)
留言9則, 5人參與, 最新討論串1/1
最近在做clone 使用限制 酉每 作DNA的切割都沒有辦法作用的很完全 導致我想要的目標DNA片段量很少 但是電泳結果卻有很亮的band在上方 想問一下 酵素保有活性的時間大約是多少? 因為我每次作兩小時的反應 切割都結果都不太好 我想拉長作用的時間 但是不想多等酵素已經失活的時間(ex:有活性12hr,卻等了24hr) -- ╮(╯_╰)╭ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.122.152.150

09/21 20:10, , 1F
應該是buffer的問題吧!! buffer對,切2小時效率應該有95%
09/21 20:10, 1F

09/21 20:50, , 2F
應該不是切不完全,而是target過小,亮度跟vector肯定差很多
09/21 20:50, 2F

09/21 21:14, , 3F
推樓上 的確有可能是此情形
09/21 21:14, 3F

09/21 22:46, , 4F
但應該只有a,b,c三片段 卻多跑出a+b之類的 這該怎麼辦呢
09/21 22:46, 4F

09/22 00:19, , 5F
用哪種酵素切? 是哪種Buffer?
09/22 00:19, 5F

09/22 01:10, , 6F
我遇到不少個 不曉得是不是酵素失活還是怎樣
09/22 01:10, 6F

09/22 01:11, , 7F
老是會跑出一些該切卻沒有切的片段
09/22 01:11, 7F

09/23 11:07, , 8F
使用方法應該有說到切16小時的方法,何不試試看...
09/23 11:07, 8F

09/24 13:24, , 9F
把sample跟限制?的量放大,效果會比較好些
09/24 13:24, 9F
文章代碼(AID): #18rZWZux (Biotech)
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