[求救] RT-PCR 問題
各位先進大家好:
我在做RT-PCR部分一直都做不出來, RNA 品質也都有1.8左右在做RT
時有把轉出的cDNA拿去測260nm 吸光值約1.4左右(一百倍)進一步做
PCR時測吸光值也有0.33(稀釋一百倍) 但是跑膠時marker可以看到
但是要看的基因像是beta-actin,COX-2都沒有band 但是吸光值都有
明顯的高於空白組的0.1, 但是就是照膠時看不到任何band...但是
之前做就有 條件也沒有改變過,用的核酸染劑與Loadinf buffer都
可以清楚的看到marker的band,本來也懷疑是蛋白質污染造成的偽
陽性吸光值,但是測260/280的比值也都有1.9,RT與PCR套組也是用
新的,請問板上的各位高手,一直很納悶為什麼吸光值有,但是跑膠
就看不到,但是marker 確有清楚的band呢!? 謝謝大家!!
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昂首千丘遠 嘯傲風間
堪尋敵手共論劍
高處不勝寒
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