[求救] 想請問免疫螢光染色 染兩個顏色的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (旅行的意義)時間17年前 (2008/10/02 14:37), 編輯推噓2(202)
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不好意思,我想要請問一下 因為我的免疫螢光染色需要染兩個protein 一個是主要要看的target protein 另一個則是組織的specific marker 所以就會染兩個顏色 一個是染紅光 一個是染綠光 兩個抗體的宿主來源不一樣 我試過將兩個抗體一起用Ab solution dilute 然後同時加玻片上 也試過分開dliute 等主要target protein的Ab overnight之後 再染第二個Ab 室溫2hr 但是在最後拍照的時候 兩種方法的結果和先前的單獨染一個抗體的結果相比 綠光的target protein的aggregation 就會變得比先前單獨染綠光(只加一個抗體)時還不明顯很多 請問有沒有人同時染過兩個螢光 那在條件上應該要如何更改比較好呢? 先謝謝大家了! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.177.113

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建議這一類問題把抗體名字清楚寫上來 討論起來比較方便
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比如說 1st: mouse IgG α human ProI (tissue marker)
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若只看您的敘述 我覺得在同時雙染時 可將綠光抗體濃度增加
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有時單染與雙染的最佳稀釋倍數會有差異 要titrate看看結果
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文章代碼(AID): #18v6mwpr (Biotech)
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