[求救] 還是萃取蛋白質的問題>"<

看板Biotech (生命科學)作者 (妹妹兒)時間17年前 (2008/10/06 17:24), 編輯推噓7(7014)
留言21則, 7人參與, 7年前最新討論串1/1
因為後來時間的關係 我來不及參考各位給的建議 ( 離心完剩pellet冰在-80度 ) 細胞就先用刮勺刮下來,然後使用PBS保存冰在-20度(尚未離心) 保存大概5~6天 這樣對我而後萃取蛋白質 會有很大的影響嗎>"< 有這樣做過的人 可以告訴我嗎? 謝謝大家~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.130.200

10/06 17:48, , 1F
還是可以做 但下次最好冰-80XD
10/06 17:48, 1F

10/06 17:49, , 2F
上次弄IP丟在4度C讓她轉兩天(後來沒要用就忘了)
10/06 17:49, 2F

10/06 17:50, , 3F
想到後去拿還來自己無聊偷跑看看 還是有很強的signal
10/06 17:50, 3F

10/06 17:50, , 4F
不過要確保你的protease inhibitor要夠量Orz
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10/06 17:58, , 5F
有人在還沒lyse cell之前就加protease inhibitor嗎?
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10/06 18:01, , 6F
原po的問題就像一塊餅乾掉到地上,吃下去會有很大影響嗎一樣
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10/06 18:03, , 7F
可是實驗是自己的,除非弄個對照,否則不會知道影響多大
10/06 18:03, 7F

10/06 19:12, , 8F
-20 會產冰晶,這樣細胞就破了,蛋白質溶液分解掉喔!!
10/06 19:12, 8F

10/06 22:08, , 9F
下次沒時間的話試一下這一招.把貼壁細胞用PBS沖一下, 然後加
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10/06 22:10, , 10F
你的萃取液如T-Per之類的,整個dish周邊用parafilm封好,直接
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10/06 22:11, , 11F
放在-80,放個一兩個月都還可以作Western
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10/06 22:55, , 12F
囧 沒注意到還是細胞狀態- -
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10/07 11:36, , 13F
推leftt的作法 (趕時間的時候)
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10/07 11:37, , 14F
但是我會再用個夾鏈袋裝起來,不然時間久了可能要在雪堆
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10/07 11:37, , 15F
裡面找東西
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10/07 15:19, , 16F
蛋白的東西最好是一次做到完,除非你不太在意你的sample
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10/07 15:20, , 17F
很多人說實驗做不出來往往是貪圖小小的方便而偷懶
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10/07 15:21, , 18F
結果造成你後續實驗的困難以及複雜度...
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10/07 15:23, , 19F
一句老話: 你如何對待你的實驗,它就給你相對的結果
10/07 15:23, 19F

11/11 01:02, , 20F
放在-80,放個一兩個 https://muxiv.com
11/11 01:02, 20F

01/03 16:46, 7年前 , 21F
很多人說實驗做不出來往 https://noxiv.com
01/03 16:46, 21F
文章代碼(AID): #18wTb8oF (Biotech)
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