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[求救] Gel extration

看板Biotech (生命科學)作者 (嫩嫩)時間17年前 (2008/10/14 21:14), 編輯推噓8(8推 0噓 7→)
留言15則, 8人參與, 7年前最新討論串1/1
最近跑了幾次PCR以及用Restriction Enzyme切plasmid，跑膠時都可看到清淅的band。 不過經過Gel Extration kit extract後去測濃度卻發現ng/uL 都呈現負值，請問這是 什麼問題呢？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.197.50
推
10/14 22:00, , 1F
Gel Extration失敗,DNA留在膜上,把抽出來的再跑個膠看看
10/14 22:00, 1F
推
10/14 22:07, , 2F
酒精沒移除乾淨!
10/14 22:07, 2F
推
10/14 22:07, , 3F
慢速過幾次管柱~最後高速甩掉~純水看準點至膜上~放久點
10/14 22:07, 3F
→
10/14 22:07, , 4F
在把 DNA離下來
10/14 22:07, 4F
推
10/14 22:13, , 5F
我也曾遇過這問題 在排除樓上幾位所述可能的原因之後 我選擇改
10/14 22:13, 5F
→
10/14 22:14, , 6F
用不同的Gel Extration kit竟解決了問題 或許您可參考看看
10/14 22:14, 6F
推
10/14 23:37, , 7F
請問樓上失敗根成功的kit分別為啥呢?純粹好奇一下,謝謝~
10/14 23:37, 7F
推
10/14 23:57, , 8F
失敗的是一組放了很久才開封使用的Qiagene 後來使用的是Axygen
10/14 23:57, 8F
→
10/14 23:59, , 9F
但同一組Axygen也是有人回收率很低 不知是否跟DNA片段特性有關
10/14 23:59, 9F
→
10/15 00:06, , 10F
Qiagene->Qiagen btw,原po的kit該加酒精的bfr不知是否確定有加
10/15 00:06, 10F
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10/15 00:08, , 11F
以前學弟mini的kit 忘了加酒精 怎麼抽都抽不到DNA @@~
10/15 00:08, 11F
推
10/15 12:59, , 12F
忘了加酒精應該沒用幾次就沒了吧= =a
10/15 12:59, 12F
推
10/15 16:51, , 13F
purify後的產物有沒有再跑一次膠看看有沒有band?
10/15 16:51, 13F
→
11/11 01:03, , 14F
失敗的是一組放了很久才 https://noxiv.com
11/11 01:03, 14F
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01/03 16:46, 7年前 , 15F
酒精沒移除乾淨! https://muxiv.com
01/03 16:46, 15F
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