[討論] 跑SDS時蛋白濃度過高會有甚麼缺點嗎?

看板Biotech (生命科學)作者 (ˇpaakoiˇ)時間17年前 (2008/10/30 17:54), 編輯推噓4(409)
留言13則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
突然想到這個問題 就是不知道大家在跑SDS定蛋白值的量大概定多少會覺得高阿 或許這樣問怪怪的 我是想知道如果濃度太高會不會有不好的結果發生 還有一個問題 破完細胞(用RIPA)要收細胞時 我們家會用10000RCF離心取上清液(蛋白) 但我有幾次晃神就很順的用14000RPM給他轉下去 結果其實沒有差很多啦(因為都沒結果我還在try XD) 請問有沒有人知道會有怎樣的差別呢?? 實驗真不順 改天要來拜拜了囧 先感謝各位的討論啦 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.195.241

10/30 17:58, , 1F
分離pellet與soluble fraction的效果好一點點
10/30 17:58, 1F

10/30 17:59, , 2F
即使是超高速離心也只能分胞器,對於蛋白是沒啥影響的
10/30 17:59, 2F

10/30 18:00, , 3F
當然膜蛋白例外,沒差別的是soluble form的...
10/30 18:00, 3F

10/30 18:04, , 4F
蛋白量的多寡要看你想看的蛋白質
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10/30 18:05, , 5F
膜蛋白就可能要load很多 分子量超大的也需要多
10/30 18:05, 5F

10/30 20:22, , 6F
喔喔喔~ 謝謝你們 不過為甚麼大分子蛋白也要多阿?
10/30 20:22, 6F

10/30 21:33, , 7F
transfer效率
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10/30 23:17, , 8F
喔喔~暸改謝謝~~
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10/30 23:28, , 9F
transfer效率,表現量偏低,或個別抗體不佳?三者是難以區別的
10/30 23:28, 9F

10/30 23:37, , 10F
把transfer完的gel拿去染就知道效率了Orz
10/30 23:37, 10F

10/31 23:30, , 11F
不知道抗體不佳有沒有辦法特別知道阿...不然都要猜...
10/31 23:30, 11F

11/11 01:06, , 12F
當然膜蛋白例外,沒差別 https://muxiv.com
11/11 01:06, 12F

01/03 16:47, 7年前 , 13F
膜蛋白就可能要load https://noxiv.com
01/03 16:47, 13F
文章代碼(AID): #192OHoP9 (Biotech)
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