[閒聊] datasheet的information能信嘛?!

看板Biotech (生命科學)作者 (朋友看太重的猫)時間17年前 (2008/10/31 02:53), 編輯推噓4(4010)
留言14則, 6人參與, 7年前最新討論串1/1
如題 雖然說"不信datasheet, 你還要信啥?" 或是"反正照datasheet做不出來~可以要廠商賠錢啊"~等等 但我還是想來問一下~^^" 就是啊~ 最近買了一個要認磷酸化蛋白質的抗體 以往所學到的概念是~由於milk中含有大量的tyrosine~所以會干擾磷酸化的結果~ 因此~做磷酸化的western時~最好是用BSA來做blocking~ 但我買的那隻抗體datasheet居然說"用5% skim milk" blocking 這令我很傻眼~囧~ 雖然試了不行~可以跟廠商argue要他們賠錢~ 但sample取得不易~實在沒那個勇氣給他try下去~^^" 以前自己沒做過多少次看磷酸化蛋白的WB~所以上來請教一下其他大大們~ 真的有"即使用skim milk blocking,也做得出來的磷酸化WB"嘛!?^^" 感謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.62.72.30

10/31 03:06, , 1F
我用過近十支不同的磷酸化抗體都用milk做的,也都是很順利
10/31 03:06, 1F

10/31 03:09, , 2F
不過我的確不信datasheet的,WB都一致流程,完全不照各家步驟
10/31 03:09, 2F

10/31 07:30, , 3F
可以 有些公司的p-Ab可以用牛奶
10/31 07:30, 3F

10/31 07:31, , 4F
cell signaling的pATM pChk1 pChk2都用milk壓的出來
10/31 07:31, 4F

10/31 07:32, , 5F
但是他的pRb卻要用BSA XD
10/31 07:32, 5F

10/31 07:34, , 6F
不過如果你是要單獨針對p-tyrosine,p-serine,p-threo
10/31 07:34, 6F

10/31 07:35, , 7F
nine的話 你說的就沒錯了- -a
10/31 07:35, 7F

10/31 19:34, , 8F
好的~感謝樓上兩位大大~那我姑且信一下datasheet好了^^"
10/31 19:34, 8F

11/01 09:19, , 9F
最好的辦法 還是自己試做 因為沒有絕對的方式
11/01 09:19, 9F

11/01 09:20, , 10F
通常datasheet就當作參考用
11/01 09:20, 10F

11/02 17:25, , 11F
我用5% milk in TBST, cell signaling的phospho Ab,
11/02 17:25, 11F

11/02 17:26, , 12F
band很明顯, 沒有背景訊號.
11/02 17:26, 12F

11/11 01:06, , 13F
cell signal https://daxiv.com
11/11 01:06, 13F

01/03 16:47, 7年前 , 14F
我用過近十支不同的磷酸 http://yofuk.com
01/03 16:47, 14F
文章代碼(AID): #192WAzLq (Biotech)
文章代碼(AID): #192WAzLq (Biotech)