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[求救] 請幫我看一下Western的圖

看板Biotech (生命科學)作者 (在這裡)時間17年前 (2008/11/09 17:34), 編輯推噓3(3推 0噓 4→)
留言7則, 3人參與, 最新討論串1/1
http://cdkcyclin.pixnet.net/album/photo/103949719 這是我的Wetsern圖 我想要看的protein是HIF-1 alpha(120kD) 所使用的SDS page是10% transfer 3hr,75V,4度 1Ab,1:1000,O/N,4度 2Ab,1:5000,2hr,室溫 我這次的定量有點不準 但是我比較苦惱的是HIF-1的band看起來不太均勻 尤其是最右邊的sample 深淺不一的很嚴重 請問可能是哪裡有問題呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.160.31.74 ※ 編輯: cdkcyclin 來自: 118.160.31.74 (11/09 17:35)
推
11/09 23:43, , 1F
恩 好怪～你controls 看起來沒這些問題耶 @@
11/09 23:43, 1F
推
11/10 00:22, , 2F
請問是wet還是semi-dry transfer?最右邊的lane有點拖尾
11/10 00:22, 2F
→
11/10 12:25, , 3F
是wet
11/10 12:25, 3F
推
11/10 16:45, , 4F
有可能是PAGE時出的問題,造成sample拖尾
11/10 16:45, 4F
→
11/10 16:46, , 5F
解決辦法是sample loading時把上清部份混勻一下再加進去
11/10 16:46, 5F
→
11/10 16:48, , 6F
還有跑膠時避開最左右的lane,盡量用中間的比較不會有問題
11/10 16:48, 6F
→
11/12 22:15, , 7F
謝謝你的意見 我會參考
11/12 22:15, 7F
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