[求救] 關於作果蠅的polytene chromosome的壓片技巧，救救我啊~~~
我最近都在作果蠅的polytene，之後要染色去拍confocal。
可是不管我怎麼壓片，染色體就是在核裡不出來，
要不然就是出來後，染色體卻碎掉了...orz
不知道是不是因為這樣，所以抗體染色結果都不均勻。
有的地方超亮，有的地方卻很暗。
我壓片的方法是:
1.把唾腺取出後放到載玻片，以Triton-X solution作用幾分鐘，再丟到醋酸中。
2.接著輕放上蓋玻片，左手食指母指定住蓋玻片，以鑷子另一頭，輕敲蓋玻片。
3.一樣用鑷子另一頭(鈍端)，橫向用力刮蓋玻片。
p.s我不知道是不是這個步驟有錯，染色體容易碎掉!?
後來也試過用拇指直接按，結果染色體完全沒出來..
4.接著就拿去顯微鏡，先觀察壓的成果。
5.若有水在流動，用手掌下半部，再用力下壓，壓到顯微鏡下沒有水流。
p.s不過似乎有時候壓到水都沒了...乾掉!?=口=
6.然後丟到液態N2幾秒鐘，存放methanol中，待染色用。
這個實驗....殺了上百條的larve了....取唾腺的技巧進步很多，
但壓片完全就是慘烈...老師說至少要壓到70%以上染色體都出核，才算及格...
求壓片高手，救救我啊~~~~有沒有什麼撇步可以壓的漂亮的????>"<
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