Re: [求救] 如何減少western control的量
1. Cold PBS was prevented to use in wash process, because temperature
shock maybe occurred in signaling test.
2. How about reduce serume to 1% ?
※ 引述《jackness (馬的!!要拼老命了!)》之銘言:
: 小弟最近在做signaling pathway的define
: 我是用THP-1 cell 然後利用PMA使其分化成MACROPHAGE
: 然後加藥看哪條PATHWAY會被TURN ON
: 但是我發現0分鐘的 P-P38 OR P-JNK 都滿高的 (COMPARE TO 加藥的5~60分鐘)
: 不知道該怎麼解決
: 有人有遇過類似的情形嗎
: 我是分化成MACROPHAGE後
: 先用PBS WASH 後在加藥(in medium+serum)
: 因為要洗去PMA
: 但是CONTROL的量卻很多
: 不像一般照理來講應該是沒有的 = =
: 我也用過PBS WASH 後在加藥(in complete mediume)
: 但還是沒辦法降低control 的磷酸量
: 希望聰明的大大可以幫幫忙 >"<
: 謝謝..
--
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◆ From: 122.121.3.221
推
12/03 03:12, , 1F
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