[求救] 蛋白質純化-產物退冰會沉澱

看板Biotech (生命科學)作者 (鄉民龜)時間17年前 (2008/12/31 12:24), 編輯推噓3(300)
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使用Ni2+ column純化了數批蛋白質 表現系統是BL21以及BLR elute->濃縮->通G25或透析換成PBS buffer->再濃縮->產物 產物冰存-70之後再退冰會大量雪花般片狀沉澱 且難以回溶 操作同系統的約有四五人 每個人做的都會發生退冰沉澱的情形 resin中間有換過一次牌子 兩個牌子的純化產物都有退冰沉澱情形 請問有沒有方法可以避免上述的沉澱 之後產物還需要二次純化以及通S200分離雜band 所以盡量以不影響後續處理優先 初步的想法是從存放的buffer-PBS下手 提高鹽類濃度或是添加一些物質 感謝解答及提供任何意見 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.178.15

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protein濃度提高, 產生沉澱了 提高[NaCl]
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稀釋濃度
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加點detergent看看有沒有效,Triton X-100
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文章代碼(AID): #19MlFiwr (Biotech)
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