Re: [求救] TRIZOL 抽 Plant Total RNA 量太低
看板Biotech (生命科學)作者sharkcell (我好想念妳,Chic)時間17年前 (2009/01/29 04:21)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串2/3 (看更多)
: 1. 秤重 0.1 g (頂多增加到 1.5 g). 放入Tube中. 再放入液態氮中
: 2. 自液態氮中取出 Tube,磨碎後先加300 μl TRIZOL vortex,
: 再加700 μl TRIZOL
: # 我也用過研缽磨成粉後,把粉末取出來秤重,再加TRIZOL,
: 但濃度還是一樣低,不知道是不是動作不夠快
我以前抽過馬鈴薯葉片的RNA(total RNA)
做法大至跟你差不多
我事先將葉片摘下後後入研磨杯中
然後加入液態氮磨碎
取大約100mg到eppendorf中
再加入1mL TRISOL混合均勻
剩下的作法跟你差不多
濃度也夠作real-time RT-PCR
至於cDNA我就不清楚了
也許您過程中有點污染
或是sample基因的表現量本來就不高
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